Ua iloa le faasologa o genomic o le tele o siama.Nucleic acid su'esu'e o ni vaega pupuu o le DNA ua fuafuaina e fa'afefiloi ma vaega viral DNA po'o vaega RNA.Ole polymerase chain reaction (PCR) ose auala e sili atu ona lelei mo le suʻeina o viral.O metotia fa'ata'ita'i fa'amautu maualuga ua fausia talu ai nei.
A. Nucleic acid hybridization technique
Nucleic acid hybridization, aemaise lava e aofia ai Southern blotting (Sauthern) ma Northern blotting (Northern), o se auala vave ona atiaʻe fou i le vaega o suʻesuʻega siama.O le mafuaaga o le su'esu'ega fa'afefiloi o le fa'aogaina lea o vaega pu'upu'u o le DNA (ua ta'ua o le "su'esu'e") ua fuafuaina e fa'afefiloi ma vaega viral DNA po'o vaega RNA.E ala i le fa'avevela po'o le fa'ama'iina o le alkaline, o le DNA po'o le RNA taula'i fa'alua e tu'u'ese'ese i ni manoa ta'itasi ona fa'amautu lea i luga o se lagolago mautu.A maeʻa lena, faʻaopoopo le suʻega ma faʻafefiloi ma le DNA poʻo le RNA.A'o fa'ailogaina le su'esu'ega i le isotope po'o le nuclide non-radioactive, e mafai ona iloa le DNA po'o le RNA e ala i le autoradiography po'o le biotin-avidin system.Talu ai ona o le tele o genomes viral ua fa'apipi'iina ma fa'asologa, e mafai ona iloa i latou i le fa'aogaina o fa'asologa fa'apitoa fa'ama'i e fai ma su'esu'ega i le fa'ata'ita'iga.I le taimi nei, o auala faʻapipiʻi e aofia ai: dot blot , in situ hybridization in sela , DNA blotting(DNA) (Southern blot) ma RNA blotting(RNA) (Northern blot).
B.PCR Tekonolosi
I tausaga talu ai nei, o se faasologa o in vitro nucleic acid amplification techniques ua atiaʻe e faʻavae i luga o le PCR, e faʻataʻitaʻi ai siama le mautonu pe le mafai ona faʻaaogaina.O le PCR ose metotia e mafai ona fa'atupuina fa'asologa DNA fa'apitoa e ala ile in vitro polymerase reaction.O le faagasologa o le PCR e aofia ai se taamilosaga vevela o laasaga e tolu: denaturation , annealing , ma le faʻaopoopoga I le maualuga o le vevela (93 ℃ ~ 95 ℃), o le DNA faʻalua-lua e vavae ese i ni laina se lua DNA;ma i le maualalo o le vevela (37 ℃ ~ 60 ℃), lua synthesized nucleotide primers faʻapipiʻi i vaega DNA lagolago;A'o le vevela talafeagai mo le Taq enzyme (72 ℃), o le fa'asologa o filifili DNA fou e amata mai le fa'ai'uga muamua e fa'aaoga ai le DNA fa'aopoopo e fai ma fa'ata'ita'iga ma nucleotides e tasi e fai ma mea.A maeʻa la taʻamilosaga taʻitasi, e mafai ona faʻateleina le filifili DNA e tasi i ni filifili se lua.O le toe faia o lenei faagasologa, o filifili DNA taitasi e tuufaatasia i le taamilosaga e tasi e mafai ona faʻaaogaina e fai ma faʻataʻitaʻiga i le isi taamilosaga, ma le numera o filifili DNA e faʻaluaina i taʻamilosaga taʻitasi, o lona uiga o le gaosiga o le PCR e faʻateleina i le 2n log speed.A maeʻa le 25 i le 30 taamilosaga, o le gaosiga o le PCR e faʻaalia e ala i le electrophoresis, ma o mea faʻapitoa DNA e mafai ona matauina i lalo ole malamalama o le UV (254nm).Mo lona lelei o le faʻapitoa, maʻaleʻale, ma le faʻaogaina, ua faʻaaogaina le PCR i suʻesuʻega faʻamaʻi o le tele o faʻamaʻi pipisi e pei ole HCV, HIV, CMV, ma le HPV.Talu ai o le PCR e matua maaleale, e mafai ona iloa le DNA virus i le fg, e tatau ona faia ma le faʻaeteete le taʻaloga e aloese ai mai le sese.E le gata i lea, o le i'uga lelei ile su'ega nucleic acid e le fa'apea o lo'o iai fa'ama'i pipisi ola ile fa'ata'ita'iga.
Faatasi ai ma le lautele o le faʻaogaina o le PCR, o auala fou ma metotia e atiaʻe e faʻavae i luga ole PCR mo suʻega eseese.Mo se faʻataʻitaʻiga, o le PCR faʻatusatusaina taimi moni e mafai ona iloa viral uta;in situ PCR e fa'aoga e fa'ailoa ai fa'ama'i fa'ama'i i totonu po'o sela;Ole nested PCR e mafai ona fa'ateleina le fa'apitoa ole PCR.Faatasi ai ma i latou, o le taimi moni quantitative PCR ua vave ona atiaʻe.Ole tele o auala fou, e pei ole su'esu'ega ole hydrolysis ole TaqMan, su'esu'ega hybridization, ma su'esu'ega su'esu'e mole mole, ua tu'ufa'atasia i le taimi moni ole PCR metotia, lea e fa'aaogaina lautele i su'esu'ega falema'i.E ese mai i le faailoaina sa'o o le viral load i le sua o le tino o tagata mama'i, e mafai foi ona faaaoga lenei metotia e iloa ai le mutant e onosaia fualaau faasaina.O le mea lea, o le taimi moni o le PCR quantitative e masani ona faʻaaogaina i suʻesuʻega faʻamalologa ma le mataʻituina o le faapalepale o fualaau.
C. Su'esu'ega maualuga o siama nucleic acids
Ina ia fa'amalieina mana'oga mo su'esu'ega vave o fa'ama'i pipisi fou ua tula'i mai, ua fa'atūina auala eseese e su'esu'e ai le maualuga, e pei o DNA chips (DNA).Mo DNA meataalo, o su'esu'ega fa'apitoa e tu'ufa'atasia ma fa'apipi'i i tama'i meata'i konika i le maualuga tele e fai ai le DNA su'esu'e microarray (DNA) lea e mafai ona fa'afefiloi ma fa'ata'ita'iga.O le faailo o le hybridization e mafai ona faʻatusaina e confocal microscope poʻo le laser scanner ma faʻagasolo atili e le komepiuta ma faʻapipiʻi tele faʻamaumauga e uiga i kenera eseese e mafai ona maua.E lua ituaiga o pusi DNA.O le "synthesis chip" e pei ona taua i lalo: o le oligonucleotides patino o loʻo faʻapipiʻiina saʻo i luga o tupe meataalo.O le isi o le DNA pool chip.O genes cloned po'o oloa PCR o lo'o lolomi lelei i luga o le fa'ase'e.O le lelei o le DNA chip technology o le suʻesuʻeina faʻatasi lea o le tele o faʻasologa o DNA.Ole fa'ata'ita'iga fou ole pu'upu'u fa'ama'i fa'ama'i e mafai ona fa'ailoa le silia ma le 1700 virusi tagata i le taimi e tasi.Tekinolosi pu'e DNA fo'ia fa'afitauli o auala fa'a'a'ai tu'ufa'atasiga o le nucleic acid ma e matua lautele lona fa'aogaina i fa'ama'i viral ma su'esu'ega fa'ama'i.
Taimi meli: Tes-23-2020